la Sclerosi multipla .. Ccsvi vista da SAM, e NON solo: da FDA.GOV

Da FDA.GOV

Panoramica generale

L'emergere di infezioni da virus patogeni come l'influenza e l'HIV ha creato un urgente bisogno di nuovi vaccini.

I vaccini a base di virus sono prodotti nelle cellule viventi (substrati cellulari). Alcuni produttori stanno studiando l'uso di nuove linee cellulari per produrre vaccini. La continua crescita delle linee cellulari assicura che vi sia un approvvigionamento costante delle stesse cellule che possono produrre elevate quantità di vaccino.

In alcuni casi le linee cellulari utilizzate potrebbero essere tumorigeniche, cioè formare tumori quando iniettate nei roditori. Alcune di queste linee cellulari che formano il tumore possono contenere virus cancerogeni che non si riproducono attivamente. Tali virus sono difficili da rilevare utilizzando metodi standard. Questi virus latenti o "silenziosi" rappresentano una potenziale minaccia, poiché potrebbero diventare attivi in condizioni di produzione di vaccini. Pertanto, per garantire la sicurezza dei vaccini, il nostro laboratorio sta studiando i modi per attivare i virus latenti nelle linee cellulari e rilevare i virus attivati, così come altri virus sconosciuti, utilizzando le nuove tecnologie. Adatteremo quindi i nostri risultati per rilevare virus negli stessi tipi di substrati cellulari utilizzati per produrre vaccini. Stiamo anche cercando di identificare specifici processi biologici che riflettono l'attività del virus.

Questi metodi consentiranno agli scienziati della FDA di aiutare i produttori a determinare se il loro substrato cellulare specifico è sicuro da usare per la produzione di vaccini. I metodi che il nostro laboratorio sta sviluppando e testeranno aiuteranno a garantire la produzione di vaccini sicuri ed efficaci in due modi: 1) la FDA sarà in grado di sviluppare linee guida per i test per i produttori che usano nuovi substrati cellulari per produrre vaccini; e 2) la FDA pubblicherà i nuovi metodi sviluppati nelle riviste scientifiche peer-reviewed, rendendoli così facilmente accessibili a tutti i produttori.

Stiamo anche valutando il rischio di infezioni da retrovirus nell'uomo. (I retrovirus sono virus dell'RNA che usano un enzima chiamato reverse transcriptase (RT) per replicarsi; l'RNA è la forma decodificata del DNA). Il virus schiumoso di Simian (SFV) può essere trasmesso da primati non umani (ad esempio, scimmie) agli umani. Sebbene non vi siano prove che la SFV causi la malattia, il virus può rimanere in uno stato di calma permanente nel DNA dopo l'infezione. Inoltre, due persone in Africa sono state recentemente trovate infette da HIV-1 e da SFV. Pertanto, è importante determinare se la SFV costituisce una minaccia per la salute umana e capire come si diffonde il virus al fine di creare strategie per il controllo delle infezioni umane. Tale lavoro aiuterà anche la FDA a sviluppare una nuova politica relativa alla donazione di sangue da parte di individui che lavorano con primati non umani e all'implementazione di linee guida formali di sicurezza per le persone che lavorano con animali infetti da SFV. Stiamo anche studiando le conseguenze della doppia infezione da SFV e HIV-1 nel modello di scimmia.

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Panoramica scientifica

Rilevazione di virus latenti nei substrati cellulari per la sicurezza del vaccino. L'urgente richiesta di vaccini contro le malattie emergenti ha reso necessario l'uso di nuovi substrati cellulari. Questi includono cellule tumorigeniche quali cellule MDCK e CHO (per vaccini virus dell'influenza), 293 e cellule PER.C6 (per HIV-1 e altri vaccini adenovirus vettorizzate) cellule, e tumorali derivate quali cellule HeLa (per l'HIV-1 vaccini).

L'uso di cellule tumorigeniche e derivate da tumore è una delle maggiori preoccupazioni per la sicurezza a causa della potenziale presenza di virus come retrovirus e virus oncogenici del DNA che potrebbero essere associati a tumorigencità, pertanto, rilevamento di virus persistenti, latenti del DNA e retrovirus endogeni nel vaccino substrati cellulari è importante per la sicurezza del vaccino, in particolare nello sviluppo di vaccini virali vivi, dove non ci sono o minima inattivazione di virus e di rimozione dei passaggi durante la produzione di vaccini.

induzione chimico è un metodo rigoroso per valutare la presenza di retrovirus endogeni come pure alcuni virus a DNA latenti che hanno il potenziale di attivazione e producono virus infettivo. Questo approccio è stato ampiamente utilizzato per le cellule di topo. Abbiamo ottimizzato condizioni di induzione virali in cellule di topo usando un standardizzato, altamente sensibile, singolo tubo PCR fluorescente migliorata trascrittasi inversa (STF-PERT) dosaggio. Abbiamo ulteriormente determinato le condizioni ottimali per l'attivazione del virus del DNA latente da una linea cellulare umana. Abbiamo esteso il test per sviluppare un approccio graduale per indurre e rilevare retrovirus endogeni e virus a DNA latenti durante la valutazione di substrati cellulari per la sicurezza del vaccino.

L'algoritmo di induzione chimica sviluppato utilizzando queste linee cellulari di controllo positivo può essere utilizzato per valutare la sicurezza di substrati cellulari vaccino innovativi per nuovi vaccini. Stiamo attualmente esaminando le tecnologie emergenti per il rilevamento di virus per identificare nuovi virus indotti e sconosciuti. Inoltre, stiamo studiando potenziali biomarcatori per l'induzione del virus

Indagini in vitro e in vivo per affrontare le preoccupazioni dei retrovirus nei prodotti biologici. I virus schiumosi di Simian (SFV) sono molto diffusi in tutti i primati non umani (NHP) e possono infettare l'uomo attraverso la trasmissione tra specie. Sebbene non vi siano ancora prove di patologie con SFV, il virus infettivo persiste nel DNA ospite. Pertanto, stiamo cercando di capire la latenza SFV e l'attivazione e fattori coinvolti nella trasmissione del virus, che sarà importante per la gestione delle infezioni SFV negli esseri umani.

Stiamo anche studiando le potenziali interazioni di SFV e SIV nel modello scimmia per prevedere l'esito di SFV e HIV-1 dual-infezioni nei casi umani segnalati, in Africa. Inoltre, i nostri studi trasfusionali nelle scimmie per quanto riguarda il rischio di trasmissione SFV da donatori di sangue infetti ai destinatari contribuiranno a decisioni politiche di donazione del sangue.

pubblicazioni

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